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His標簽與IMAC配基IMAC重要的應用是純化His標記重組蛋白,融合表達的His標簽為含有6個或更多組氨酸殘基的片段。His標簽具有相當高的親和力和特異性,因此在大多數(shù)情況下,IMAC一步純化足以制備一定純度的目標蛋白質,且可滿足很多應用的要求。標簽的結構(即位置、順序和長度)可以從多個水平影響蛋白質生產:表達率、與IMAC配基的結合能力、蛋白質三維結構、蛋白質晶體的形成等,而且其雖然對溶解度和活性影響輕微,但也有一定作用。His標簽常見的形式是由6個連續(xù)的組氨酸殘基組成,可以提供6個金屬結合位...
1-21 2022
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凝膠過濾色譜中的瓊脂糖凝膠瓊脂糖凝膠簡介基于凝膠過濾色譜的原理,對其介質的最基本的要求是不能與原料組分發(fā)生除排阻之外的任何其他相互作用,如電荷作用、化學作用、生物學作用等。理想的凝膠過濾介質具有高物理強度及化學穩(wěn)定性,能夠耐受高溫高壓和強酸強堿,具有高化學惰性,內孔徑分布范圍窄,珠粒狀顆粒大小均一度高。目前常用的有葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。瓊脂糖凝膠來源于一種海藻多糖瓊脂,是一種天然凝膠,不是共價交聯(lián),所以氫鍵交聯(lián)的鍵能比較弱。它與葡聚糖不同,孔隙度是以改變瓊脂糖濃度而達到的。瓊脂糖凝...
1-20 2022
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蛋白結合的解離常數(shù)以及在蛋白檢測和親和分離中的應用蛋白與配體能否結合、結合的強弱會直接影響蛋白檢測或純化實驗的成敗。此篇文章由月旭科技首xi科學家王國斌博士執(zhí)筆,對蛋白結合和解離常數(shù)進行了較為系統(tǒng)的講述。蛋白和配體結合的強弱不同,對于蛋白檢測以及親和分離純化實驗有顯著影響。在設計實驗時應考慮這種結合強弱影響,以便采用合適的蛋白或配體濃度(包括zui低檢測限濃度),估算結合時間,獲得最佳并且實用的結果。這對于室溫下易失去活性,或希望盡可能保持最高活性蛋白的純化尤為重要。常規(guī)的蛋白檢測方法,比如ELISA,只能測定實驗結束時的蛋...
1-18 2022
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新品發(fā)布 | Welbuffer生物緩沖液-1分鐘完成試劑配制緩沖溶液是指當加入少量強酸、強堿或稍加稀釋時,能保持其pH值基本不變的溶液,它對強酸、強堿或稀釋有一定的抵抗作用。由于緩沖溶液中同時含有較大量的弱酸(抗堿成分)和共軛堿(抗酸成分),它們通過弱酸解離平衡的移動以達到消耗掉外來的少量強酸、強堿,或對抗稍加稀釋的作用,使溶液的H+離子或OH-離子濃度沒有明顯的變化,因此具有緩沖作用。用傳統(tǒng)方法配制時需要計算、稱量、混合并使用強酸堿調節(jié)pH,操作繁瑣費時。月旭科技特推出Welbuffer緩沖速溶顆?;蚱瑒?,能夠解放您的雙手,無需攪拌...
1-12 2022
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液相色譜,你問我答(十)“不同色譜柱和不同批次之間的重現(xiàn)性問:我要開始開發(fā)一個新的HPLC方法。驗證之后,該方法將轉道QC實驗室并將使用許多年。我擔心該方法的長期的重復性,特別是柱子的長期重復性。怎樣才能確保好的重復性呢?答:首先,我要表揚你在開始做這個方法的時候就能考慮到這個方面。如果可以預料到該方法將要使用好幾年,在選擇柱子方面就要做些功課。要想使柱子在該方法的可預見的適用期內使用,就要選擇一些大的生產廠家。另外,要選擇一種標準的表面化學物質(比如C18或C8)而不是那些新奇的或很少使用的。下一...
1-11 2022
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WiSys5000+Xtimate®C18 助力水楊酸有關物質分析水楊酸(SalicylicAcid,CAS:69-72-7,C7H6O3)是一種脂溶性的有機酸,外觀是白色的結晶粉狀物,存在于自然界的柳樹皮、白珠樹葉及甜樺樹中,是重要的精細化工原料,可用于阿司匹林等藥物的制備。具體物性數(shù)據(jù)性狀:白色針狀結晶或單斜棱晶,有特殊的酚酸味。在空氣中穩(wěn)定,但遇光漸漸改變顏色。相對密度(g/mL,20/4℃):1.443;相對蒸汽密度(g/mL,空氣=1):4.8;熔點(oC):158~161;沸點(oC,2.67KPa):210(2666pa);折...
1-10 2022
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柱壓偏高的原因排查及解決方案-下篇?柱壓偏高的原因排查及解決方案-上篇之前在上篇中小編已經給大家分享了幾點原因及解決方案,今天繼續(xù)為您分析解答。五、色譜柱保存不當原因:色譜柱如較長時間不用,重新啟用后需按說明書的活化方法重新活化后再使用,否則也會出現(xiàn)柱壓升高,柱效下降。解決辦法:按說明書重新活化色譜柱。原因:除另有規(guī)定外,一般反相色譜柱都需保存在高比例有機相中,以防止微生物滋生。否則,重新啟用時,會因微生物滋生而導致柱壓異常升高。解決辦法:這種情況,可以嘗試用乙腈-水-TFA=50-50-0.1低流速過夜沖洗...
1-6 2022
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粉末流動性測試之剪切池法一.粉末樣品流動性測試簡介藥物或輔料粉末是一種由很多細小的顆粒組成,粉末流動性對于其在生產過程中,比如混合器、料斗和其它設備中的行為至關重要,流動性不滿足要求的粉末,可能無法正常下料,或造成多種成分混合不均勻等問題。粉末的流動性取決于幾個因素,有些與粉末原材料有關,例如:粒徑及其分布、形狀、摩擦系數(shù)、粘附性、靜電電壓、空隙率、壓縮性、水分和溫度等等,有些與實際生產過程有關,例如粉末從容器(料斗、漏斗、圓筒等)流出的能力或制成片劑時的可壓縮性。美國藥典章節(jié)和歐洲藥典2.9.36...
1-5 2022